Ultrastructure evaluation of goat spermatozoa after freezing in a skim milk-based extender with Trolox supplementation.

The aim of this work was to evaluate the in vitro effect of adding Trolox in freezing extender for goat semen. Ejaculates from five bucks were evaluated, and when approved, the samples were pooled, diluted according to experimental groups [Trolox 0 (control), 30, 60 and 120 nmol ml(-1) ] and frozen in an automated system. Thawed samples (37 °C/30 s) were evaluated for plasma membrane (PMi) and acrosome integrity (Aci), mitochondrial membrane potential (MMP) and sperm kinematics by CASA system. Spermatozoa ultrastructure was evaluated in fresh and post-thawed semen. No significant difference (P > 0.05) was observed among control and Trolox groups in the analyses of PMi, Aci, MMP and CASA in goat spermatozoa after thawing. Samples of 60 and 120 nmol ml(-1) Trolox groups had a higher percentage of cells that had intact plasma membranes in spermatozoa head than in the other groups, although they did not differ (P > 0.05) before being frozen. A higher percentage (P < 0.05) of spermatozoa with intact mitochondria was observed in fresh semen, control and Trolox 60 nmol ml(-1) groups than in the other groups. Addition of Trolox to skim milk extender at 60 nmol ml(-1) ultrastructurally preserves the plasma membrane and mitochondrial sheath integrity in goat spermatozoa after cryopreservation.

Testicular and epididymal ltrasonography in Santa Inês lambs raised in Brazil

The objective of this work was to study, through ultrasonographic evaluation, changes in testes and epididymides of clinically healthy, peripubertal and pubertal Santa Inês lambs raised in Brazil. Periodic e valuations of weight, biometric characteristics (scrotal circumference, width and length) and ultrasound examinatio ns of the testes and epididymides of 20 lambs were performed between 84 and 280 days old at intervals of 28 days. Scans were performed in the sagittal, transverse, frontal and oblique planes to evaluate the echotexture of the testicular parenchyma and mediastinum and the tail epididymis as well as the thickness and width of the mediastinum testis. The testicular parenchyma demonstrated a homogeneous echogenicity patter n ranging from low to moderate. The echogenicity of testicular parenchyma increased in direct proportion to animal age, being higher in pubertal lambs when compared to prepubertal at the same age. The mediastinum testis was observed in 100% of the evaluated animals, regardless of the scan plane used, and was classified as diffuse or moderately or highly echogenic. Echogenicity and the thickness of the mediastinum testis increased in direct proportion to animal age. The epididymal tail was presented in hypoechoic relation to the testicular parenchyma. Based on these results, it was concluded that ultrasound is useful tool for selection and morphophysiological evaluation of Santa Inês lambs on peripubertal and pubertal phases, when used in combination with other methods such as semen evaluation.

Achados ultrassonográficos nos testículos e epidídimos de carneiros deslanados jovens e clinicamente sadios / Ultrasonographic findings in the testis and epididymis of clinically healthy young hair sheep

Objetivou-se descrever os achados ultrassonográficos nos testículos e epidídimos de carneiros jovens. Análises de desenvolvimento ponderal, mensurações das características biométricas testiculares e exames ultrassonográficos foram realizados dos 140 aos 280 dias de idade, a cada 28 dias. O parênquima testicular apresentou ecogenicidade homogênea (baixa a moderada) que aumentou com a idade. A ecogenicidade e a espessura do mediastino aumentaram com a idade, e a cauda do epidídimo apresentou aspecto hipoecoico em relação ao parênquima testicular. Foram observadas calcificações de grau leve nos testículos de cinco cordeiros. Conclui-se que o exame ultrassonográfico contribui para o monitoramento dos testículos e epidídimos de carneiros.

This study aimed to describe ultrasonographic findings in the testis and epididymis of young sheep. Evaluations of the development of weight, measurements of biometric characteristics of the tests and ultrasound examinations of the tests and epididymis were performed from 140 to 280 days of age, each 28 days. The testicular parenchyma showed homogeneous echogenicity (low to moderate) and increased with the age. The mediastinum echogenicity and thickness increased with age and the epididymis tail showed hypoechoic appearance in relation to the testicular parenchyma. Mild calcification was observed in the testis parenchyma of five lambs. In conclusion, ultrasonographic exams help to monitor testes and epididymis of young hair rams.

Interferência da condição climática na integridade de espermatozoides ovinos submetidos à criopreservação / Climate condition interference on ram spermatozoa integrity submitted to cryopreservation

Avaliou-se a integridade de espermatozoides ovinos colhidos e criopreservados em diferentes situações climáticas na região semiárida do estado da Paraíba. As colheitas de sêmen foram realizadas em duas épocas do ano, período seco e período chuvoso, utilizando cinco machos adultos da raça Santa Inês, com histórico favorável de fertilidade. Os ejaculados foram avaliados quanto à motilidade, vigor, concentração e morfologia espermática, após a formação do pool e diluição em Tris-gema, na concentração final de 240x10(6) espermatozoides/mL. Motilidade total e vigor espermático não diferiram entre as épocas seca e chuvosa. Valores de integridade do acrossoma e da membrana plasmática, e o potencial de membrana mitocondrial foram mais baixos (P<0,05) na época com menor índice pluviométrico. Conclui-se que a reprodução de ovinos criados na região do semiárido paraibano sofre ação da condição climática e sugere-se que a criopreservação de espermatozoides ovinos seja realizada no período de maior índice pluviométrico na região.

Ram spermatozoa integrity collected and cryopreserved in different climatic situations in the semiarid region of Paraíba state was evaluated. Semen samples were collected in two periods: a dry and a rainy season, using five mature Santa Inês males, with favorable historical fertility. Ejaculates were evaluated for motility, vigor, concentration and morphology, after a pool formation and dilution in Tris-yolk egg, at 240x10(6)/mL final concentration. Motility and sperm vigor did not differ between dry and rainy seasons. Acrosome integrity, plasma membrane and mitochondrial membrane potential were lower (P>0.05) at the time with less rainfall. We concluded that sheep reproduction raised in semi-arid Paraiba region suffers climatic condition influence and the lowest rainfall period is deleterious to the sperm cells integrity subjected to cryopreservation process. It is suggested that ram spermatozoa cryopreservation be done in period of greatest rainfall in this region.

In vitro and in vivo evaluation of ram sperm frozen in tris egg-yolk and supplemented with superoxide dismutase and reduced glutathione.

The aim of the present study was to evaluate the in vitro and in vivo effect of the addition of superoxide dismutase (SOD) and reduced glutathione (GSH) to ram semen freezing extender. Significant differences (p < 0.05) were detected between groups regarding total motility (TM), straightness (STR) and wobble (WOB), for which the GSH 7 mM group had lesser TM and better STR than the other groups and the GSH 5 and 7 mM groups had higher wobble values than the control, SOD 25 and 100 U/ml groups. The ultrastructural analysis revealed that the acrosome was better preserved after freezing in the SOD 100 U/ml and GSH 2 and 5 mM (p < 0.05) groups than the other groups, whereas mitochondria in both the control group and the 7 mM GSH group suffered the greatest damage. The plasma membrane remained preserved after freezing, regardless of the group. For in vivo fertilization, the SOD group achieved better results than the GSH group (p > 0.05). It can therefore be concluded that the addition of SOD 100 U/ml and GSH 2 and 5 mM preserves the acrosome integrity of frozen ram spermatozoa, while the addition of SOD 100 U/ml to Tris egg-yolk extender offers protection to the membranes of sperm cells after thawing.

Induçäo do parto em cabras de raças leiteiras mediante aplicaçäo de cloprostenol / Induction of parturition in dairy goat by administration of cloprostenol

Conduziram-se dois experimentos com o objetivo de avaliar a eficiência do cloprostenol em diferentes doses e vias de aplicaçäo na induçäo do parto em cabras. No primeiro, 14 cabras das raças leiteiras Anglo-Nubiana, Saanen e Pardo-Alpina foram submetidas, no 145º dia de prenhez, a três tratamentos: T1.1 = 25µg (n=04), T1.2 = 50µg (n=05) e T1.3 - 100µg (n=05) de cloprostenol, administrados por via intramuscular na vulva (IMV). Três cabras prenhes das mesmas raças foram utilizadas como controle. Os partos ocorreram com: T1.1 = 30,13ñ4,77h, T1.2 - 32,43ñ4,82h e T1.3 = 34,29ñ3,96h, e a amplitude do tempo de ocorrência dos partos foram de: 11,58h, 12,25h e 7,40h, respectivamente. Näo foram observadas diferenças estatísticas entre os tratamentos, embora T1.3 tenha apresentado uma resposta mais consistente (CV=11,55 por cento) que T1.1 (CV=15,83 por cento) e T1.2 (CV=14,86 por cento). No segundo experimento, 51 fêmeas das mesmas raças foram distribuídas, no 145º dia de prenhez, em quatro tratamentos: T2.1 = 25µg (n=14), T2.2= 50µg (n=12), T2.3 = 75µg (n=12) de cloprostenol administradas IMV e T2.4 - 75µg (n=13) de cloprostenol na musculatura da coxa (IM). Os intervalos entre a induçäo e o parto foram de: T2.1 = 34,89ñ13,57h, T2.2 = 30,06ñ3,82h, T2.3 = 29,99ñ1,81h e T2.4 = 37,44ñ22,15h. Näo houve diferença estatística significativa entre os tratamentos. Entretanto, T2.3 mostrou-se mais consistente ao apresentar coeficiente da variaçäo menor (CV=6,04 por cento) que T2.1 (CV=38,88 por cento), T2.2 (CV=12,70 por cento) e T2.4 (CV=59,17 por cento). Constatou-se, também, que os tratamentos permitiram a concentraçäo dos partos no 146º dia de prenhez, com amplitude de ocorrência de 0,62 dia e 3,07 dias no primeiro e segundo experimento, respectivamente, contra 11 dias para o grupo controle no primeiro experimento. Conclui-se que as doses de 25, 50 e 75µg de cloprostenol, aplicadas por via IMV, foram efetivas em induzir o parto em cabras, sendo a dose de 75µg aparentemente a mais eficaz

Eficiência do flunixin meglumine no controle da regressäo lútea prematura em cabras superovuladas / Efficiency of flunixin meglumine in the control of premature luteal regression in supervovulated goats

Testou-se a eficácia de três doses de flunixin meglumine, um anti-prostaglandínico que impede a regressäo lútea precoce, em 32 cabras, sob estro sincronizado com esponjas vaginais, por 11 dias, impregnadas com 60mg de acetato de medroxiprogesterona, e aplicaçäo intramuscular de 50µg de cloprostenol no nono dia da sincronizaçäo. Nesse dia, também, teve início a superovulaçäo das doadoras com 9mg de FSH, fracionadas em seis aplicaçöes, em doses decrescentes, com intervalo de 12 horas. Três dias após a retirada das esponjas, iniciaram-se os tratamentos (T) com flunixin meglumine, nas seguintes doses por aplicaçäo: T1=0,00; T2=1,10; T3=1,65 e T4=2,20mg/kg de peso vivo, em um esquema de oito aplicaçöes, intervaladas de 12 horas. As fêmeas foram cobertas por reprodutores de fertilidade comprovada e as colheitas dos embriöes foram realizadas por laparotomia, entre o sexto e oitavo dia após a última cobertura. Os sintomas de estro foram observados em 84,34 por cento das fêmeas após os tratamentos de sincronizaçäo e superovulaçäo, principalmente entre 12 e 36 horas da retirada das esponjas. A ovulaçäo ocorreu em 87,10 por cento dos animais. As porcentagens de corpos lúteos funcionais em T1, T2, T3 e T4 foram, respectivamente, 54,95 e 45,04; 98,06 e 1,94; 67,16 e 32,83; 80,41 e 19,58. As maiores porcentagens de recuperaçäo embrionária ocorreram em T2; 51,45 e T4; 49,48 e as menores em T3 e T1, 32,83 e 28,83, respectivamente, mostrando relaçäo positiva com os porcentuais de corpos lúteos funcionais. T2 e T1 apresentaram os maiores valores de embriöes viáveis, 64,15 por cento e 56,25 por cento, respectivamente, seguidos por T4, 45,83 por cento e T3, 36,36 por cento. A dose de 1,10mg/kg de flunixin meglumine apresentou melhores resultados